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    ELISA試劑盒需把握的關鍵

    日期:2024-06-02 13:22
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    摘要:ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色...
    ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。
    ELISA法由于操作簡略,已被廣泛應用,咱們就來談談ELISA試劑盒需把握的關鍵有哪些?
    1. 在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。一切試劑瓶蓋須蓋緊以避免蒸發和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導致呈現錯誤的結果。
    2. 小心汲取試劑并嚴格遵守給定的孵育時刻和溫度。請注意在汲取標本/規范品,酶結合物或底物時,一個孔與一個孔加樣之間的時刻距離假如太大,將會導致不同的“預孵育”時刻,然后明顯地影響到測量值的準確性及重復性。
    3. 試劑盒保存:部分試劑保存于-20C,部分試劑保存于2-8C,具體以標簽上的標示為準。
    4. 濃洗滌液會有鹽分出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
    5. 剛敞開的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質,此為正?,F象,不會對試驗結果造成任何影響。
    6. 一切的樣品都應管理好,依照規則的程序處理樣品和檢測設備。
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